北京細(xì)菌內(nèi)毒素檢測 湖州申科生物技術(shù)股份供應(yīng)

內(nèi)毒素檢測中，樣品中的蛋白質(zhì)或酶的修飾作用易破壞鱟試劑的反應(yīng)體系，導(dǎo)致檢測結(jié)果失真。鱟試劑檢測內(nèi)毒素的本質(zhì)是一系列絲氨酸蛋白酶的酶促放大過程，若樣品中存在氧化劑、抗氧化劑、蛋白水解劑或?qū)Ｒ皇Щ顒瑫苯訙缁罘磻?yīng)所需的酶；而乙醇、苯酚等物質(zhì)則會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，同樣抑制反應(yīng)進(jìn)程。例如，某些生物制品中含有的蛋白水解酶，可能提前降解鱟試劑中的蛋白酶，使內(nèi)毒素?zé)o法被正常檢測。為消除這類干擾，需優(yōu)先限制樣品中抑制物的含量：可采用內(nèi)毒素檢查用水稀釋樣品，降低抑制物濃度；對耐熱的抑制物（如部分蛋白水解酶），可通過加熱滅活處理（如 56℃孵育 30 分鐘）破壞其活性；若樣品基質(zhì)復(fù)雜，還可使用超濾技術(shù)分離內(nèi)毒素與干擾蛋白質(zhì)，避免修飾作用對酶促反應(yīng)的影響，保障內(nèi)毒素檢測結(jié)果的可靠性。 內(nèi)毒素檢測復(fù)孔 CV＞15%，需校準(zhǔn)移液**，規(guī)范加樣，排查耗材污染。北京細(xì)菌內(nèi)毒素檢測

內(nèi)毒素檢測鱟試劑的反應(yīng)受pH的干擾。在進(jìn)行檢測時，要調(diào)節(jié)被測溶液的pH值，使鱟試劑與供試品溶液的混合溶液pH值落在鱟試劑指定的使用pH范圍內(nèi)（一般鱟試劑作用pH值在6.0~8.0范圍內(nèi))。用于調(diào)節(jié)pH值的試液或溶液（酸或堿)，可采用BET用水配制，并將溶液在無熱原容器中儲存；必須對試液或溶液進(jìn)行驗證，以證明不含可檢出的內(nèi)毒素并且無干擾因素。調(diào)節(jié)pH試劑（酸或堿）的添加量，不應(yīng)該超過供試品的1092。如果超過10%，則在進(jìn)行計算時，將DH試劑的添加量的系數(shù)計算進(jìn)去。 江蘇抗體藥物內(nèi)毒素檢測技術(shù)升級內(nèi)毒素檢測方法多樣，影響因素及實驗干擾較多，包括實驗操作步驟、樣品處理等方面。

2024年7月26日，《美國藥典》微生物委員會正式宣布，將第<86>章“使用重組試劑的細(xì)菌內(nèi)毒素測試”納入（USP-NF），該標(biāo)準(zhǔn)定于2025年5月正式生效。這一重要舉措不僅標(biāo)志著細(xì)菌內(nèi)毒素檢測領(lǐng)域從此正式邁入非動物源試劑的嶄新發(fā)展階段，更契合了全球生命科學(xué)領(lǐng)域遵循的3R原則（即通過非動物源技術(shù)替代動物實驗、減少實驗動物使用量、優(yōu)化實驗流程以降低動物痛苦）。此前傳統(tǒng)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測多依賴從鱟血中提取的試劑，而鱟作為海洋瀕危“活化石”，其資源保護(hù)與檢測需求間的矛盾長期存在；如今重組級聯(lián)試劑（rCR）憑借技術(shù)創(chuàng)新成功替代傳統(tǒng)鱟血，在有效守護(hù)藍(lán)血鱟的生態(tài)未來、緩解資源依賴?yán)Ь车耐瑫r，也為藥品生產(chǎn)中的內(nèi)毒素質(zhì)量控制和用藥**保障，提供了更先進(jìn)、更穩(wěn)定且具備長期可持續(xù)性的解決方案。

內(nèi)毒素檢測方法驗證需覆蓋多項參數(shù)，確保方法可靠：線性范圍需包含樣品預(yù)期濃度（如 0.01-10 EU/mL），相關(guān)系數(shù) R?≥0.98；準(zhǔn)確度通過加標(biāo)回收率評估，應(yīng)在 50%-200% 范圍內(nèi)；精密度包括批內(nèi)和批間精密度，CV 值均應(yīng)≤15%；檢測限（LOD）需低于產(chǎn)品限值的 1/2（如限值 0.5 EU/mL，LOD 應(yīng)≤0.25 EU/mL）；專屬性需證明無干擾物質(zhì)影響（如 β- 葡聚糖、蛋白質(zhì)不引發(fā)假陽性）。驗證通過后，方法需經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)方可使用，且定期需進(jìn)行一次回顧性驗證，確認(rèn)方法持續(xù)有效。 湖州申科內(nèi)毒素檢測服務(wù)含低內(nèi)毒素回收，通過不同樣品前處理方式搭配多種檢測方法，較大程度解決LER問題。

內(nèi)毒素檢測方法易受樣品基質(zhì)干擾，法規(guī)要求在方法應(yīng)用前必須進(jìn)行干擾驗證，選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線中點或一個靠近中點的內(nèi)毒素濃度，作為供試品干擾試驗種添加的內(nèi)毒素濃度計算回收率，若回收率在 50%-200% 范圍內(nèi)，表明無明顯干擾；若回收率異常，需通過過濾、中和、透析、加熱處理等方式優(yōu)化樣品前處理。方法學(xué)確認(rèn)還需涵蓋線性范圍（如 0.005-5 EU/mL）、精密度（批內(nèi) CV≤15%）、檢測限（LOD≤0.01 EU/mL）等指標(biāo)，確保方法在實際樣品檢測中穩(wěn)定可靠，符合《美國藥典》 <85>、《中國藥典》通則 1143 等藥典要求。 內(nèi)毒素檢測方法學(xué)驗證需覆蓋線性、精密度，確保不同批次檢測結(jié)果穩(wěn)定。上海原料藥內(nèi)毒素檢測技術(shù)升級

湖州申科生物為內(nèi)毒素檢測提供替代方法驗證，包含重組級聯(lián)試劑（rCR）與天然鱟試劑的橋接數(shù)據(jù)。北京細(xì)菌內(nèi)毒素檢測

湖州申科建立了標(biāo)準(zhǔn)化的低內(nèi)毒素回收（LER）技術(shù)服務(wù)流程，全周期支撐內(nèi)毒素檢測優(yōu)化：7 個自然日內(nèi)完成客戶溝通與 LER 確認(rèn)，用天然鱟、重組鱟等方法檢測并出具報告；60 個自然日開展方法開發(fā)，分析 LER 成因（如螯合劑、蛋白質(zhì) IP）并研究去掩蔽方案；30 個自然日進(jìn)行 HTS 驗證，完成 3 批 LER 實驗與干擾實驗，交付穩(wěn)定試劑盒、操作規(guī)程及培訓(xùn)；再協(xié)助方法轉(zhuǎn)移與 cGMP 驗證。流程每環(huán)節(jié)均圍繞內(nèi)毒素檢測展開，確保企業(yè)高效解決 LER 問題，滿足法規(guī)要求。 北京細(xì)菌內(nèi)毒素檢測